Заболевания верхних отделов пищеварительного тракта являются одними из самых распространенных видов патологии у детей. Они выявляются у 8-12% детей школьного возраста и продолжают увеличиваться [2, 10, 12]. При этом лечение детей с эрозивными гастродуоденитами (ЭГ) остается малоэффективным, часты рецидивы заболевания. Все это требует поиска новых методов терапии больных детей. Учитывая многофакторность образования эрозий слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки, логично использование с лечебной целью препарата, влияющего на различные стороны патогенеза. Таким препаратом могут стать цитамины слизистой желудка, поскольку они стимулируют регенерацию и иммунный ответ и, обладая антипротеазным действием, окажут положительное влияние на микроциркуляцию и секреторную функцию желудка. Получив положительные результаты in vitro и in vivo [1], мы решили продолжить исследование действия цитаминов желудка в клинике, используя вентрамин (Институт биорегуляции и геронтологии, Санкт-Петербург. Гигиенический сертификат №72-ЦГС-1197 от 28 ноября 1996 г.). Вентрамин получен из слизистой оболочки желудка крупного рогатого скота и свиней и представляет собой комплекс белков и нуклеопротеидов, обладающих избирательным действием на клетки слизистой оболочки желудка, способствуя ускорению восстановления функций слизистой желудка [8].
Цель работы состояла в улучшении результатов лечения детей с эрозивным гастродуоденитом.
Цитамины – новый класс органоспецифических биологически активных добавок к пище, созданный на основе нуклеопротеиновых комплексов, выделенных из органов и тканей сельскохозяйственных животных. Не являясь собственно лекарственными веществами – пептидными регуляторами они, однако, обладают мощным оздоровительным потенциалом последних. «Мягкое», физиологически регулирующее действие пищевых добавок на различные функциональные системы организма позволяет использовать их в качестве природных адаптогенов [ 3].
В основу создания и способа применения цитаминов положены три принципа. Первый состоит в том, чтобы в условиях мягкого щелочного гидролиза клетки сохранить структурные элементы хроматина, в которых естественно объединены эндогенные белки – регуляторы с комплиментарными участками ДНК. Второй принцип – использование кишечно-растворимых покрытий таблеток или капсул при пероральном приеме этих эндогенных регуляторов. Третий принцип состоит в том, что ДНК-компоненты цитаминов гомологичны для поврежденных ДНК человеческого организма, так как выделены из такой же, но здоровой ткани млекопитающих. Эффект от воздействия цитаминов проявляется на всех этапах клеточного метаболизма – от транспортировки питательных веществ через клеточную мембрану до выведения продуктов внутриклеточного обмена [7, 16].
Основной механизм биологического действия цитаминов состоит в том, что они, имея сходство по химическому строению с пептидными биорегуляторами, с одной стороны, подготавливают незрелые клетки исходной ткани к нормальному развитию в зрелые формы, а с другой – осуществляют коррекцию клеточного обмена в нормально развитых клетках той или иной ткани. В результате в ткани-мишени происходит выработка морфологически нормальных клеточных популяций с оптимальным уровнем клеточного метаболизма, и этот процесс носит физиологический характер [6].
Материалы и методы исследования
Определение концентрации иммуноглобулинов классов G, A, M проводилось методом ракетного иммуноэлектрофореза с использованием соответствующих моноспецифических антисывороток («Sevac», г. Прага). Проводилась непрямая реакция поверхностной иммунофлуоресценции с использованием моноклональных антител к кластерам дифференцировки лимфоцитов производства «ДиагноТех», г. Москва. Проводили определение провоспалительных (IL-1α, IL-8) и противовоспалительных (IL-4) интерлейкинов наборами ТОО «Цитокин» (Санкт-Петербург) на иммуноферментном анализаторе «Stat-Fax-303» (США).
Под нашим наблюдением находились 43 ребенка в возрасте 7-15 лет, страдающих эрозивным гастродуоденитом. Всем детям проведена фиброгастродуоденоскопия до и после лечения. Все дети получали диетотерапию (1 стол) и антихеликобактерные препараты. Двадцати больным совместно с общепринятой терапией проводилось лечение биологически активной добавкой вентрамин (НИИ биорегуляции и геронтологии Санкт-Петербург, Россия) по 0,01 внутрь за 30 минут до еды в течение 15 дней. Контрольную группу составили 20 здоровых детей соответствующего возраста.
Результаты исследования и их обсуждение
Клиническая характеристика различных групп пациентов представлена в таблице 1.
Таблица 1
Сравнительная характеристика различных групп пациентов
|
Клинический признак |
Больные, леченные вентрамином |
Больные, получавшие общепринятое лечение |
|
Количество пациентов из них: эрозивный гастрит эрозивный дуоденит |
20 7 13 |
23 4 19 |
|
Средняя продолжительность заболевания, лет |
1,9 |
1,8 |
|
Наследственная отягощенность |
41,7% |
25% |
|
Эпителизация эрозивных дефектов при контрольной ФГС |
95% |
95,6% |
|
Дни эпителизации |
26,8± |
26,5± |
|
Купирование болевого синдрома, дни |
4,2± |
8,3± |
|
Купирование диспепсического синдрома, дни |
1,2± |
4,8± |
Примечание: р – показатель достоверности различий
Возрастно-половой состав и продолжительность заболевания были примерно одинаковыми в контроле и опыте. У трети больных выявлена отягощенная наследственность. Болевой и диспепсический синдромы различной степени выраженности наблюдались у всех больных. Клинические проявления поражений верхних отделов желудочно-кишечного тракта у обследованной группы не отличались специфичностью, поэтому характерный симптомокомплекс эрозивного гастродуоденита (голодные боли, изжога, отрыжка кислым, тошнота) наблюдался как при эрозивном дуодените, так и при антральном эрозивном гастрите. При применении вентрамина отмечалось скорейшее купирование болевого и диспепсического синдромов.
Неполная эпителизация эрозий при контрольной ФГС наблюдалась у одного пациента из опытной и у одного из контрольной группы, причем оба они страдали эрозивным дуоденитом. Установлено, что при эрозивных процессах в гастродуоденальной зоне в периферической крови наблюдается увеличение числа лейкоцитов и лимфоцитов (таблица 2).
Таблица 2
Динамика показателей клеточного иммунитета (М±m)
|
Исследуемые показатели |
Контроль n=15 |
До лечения n=25 |
После лечения |
|
|
Общепринятое n=12 |
Вентрамин n=13 |
|||
|
CD3+ % |
60,2±2,7 |
45,8±0,7 p<0,001 |
48,0±0,9 p<0,001 p>0,05 |
55,4±0,9 p>0,05 p1<0,001 p2<0,001 |
|
CD3+ в1 мкл |
1250±35 |
1500±112 p<0,05 |
1219±74 p>0,05 p1<0,05 |
1186±63 p>0,05 p1<0,05 p2>0,05 |
|
CD 4+ % |
39,4±2,5 |
26,8±1,4 p<0,001 |
28,8±1,7 p<0,001 p1>0,05 |
32,5±0,7 p<0,01 p1<0,001 p2<0,05 |
|
CD4+ в 1 мкл |
820±19 |
822±22 p>0,05 |
738±20 p<0,01 p1<0,01 |
870±16 p<0,05 p1>0,05 p2<0,001 |
|
CD8+ % |
18,9±1,3 |
26,8±1,1 p<0,001 |
27,2±1,2 p<0,001 p1>0,05 |
26,2±1,1 p<0,001 p1>0,05 p2>0,05 |
|
CD8+ в 1 мкл |
400±10 |
684±51 p<0,001 |
641±51 p<0,001 p>0,05 |
570±36 p<0,001 p1<0,01 p2<0,05 |
|
CD16+ % |
12,2±0,9 |
11,5±1,2 p>0,05 |
10,6±0,4 p>0,05 p1>0,05 |
12,5±1,1 p>0,05 p1>0,05 p2>0,05 |
|
CD16+ в 1 мкл |
250±15 |
377±26 p<0,001 |
337±14 p<0,001 p1>0,05 |
320±29 p<0,01 p1<0,05 p2>0,05 |
|
CD4+/CD8+ |
2,1±0,14 |
1,20±0,16 p<0,001 |
1,15±0,13 p<0,001 p1>0,05 |
1,53±0,11 p<0,01 p1>0,05 p2<0,05 |
Примечание: р – показатель достоверности разницы с контролем
р1 – показатель достоверности разницы до лечения и после лечения
р2 – показатель достоверности разницы после общепринятого лечения и после лечения вентрамином
Из литературы известно, что количество Т-лимфоцитов при обострении заболевания уменьшается и их дефицит сохраняется в период ремиссии, причем снижение происходит за счет CD4+ и усиливается активность CD8+ [16, 17]. У наблюдаемой группы пациентов мы также выявили нарушение развития субпопуляций тимусзависимых лимфоцитов: снижалось процентное содержание Т-общих и Т-хелперов, при росте абсолютного и относительного числа Т-киллеров. В результате этого соотношение Tx/Tk уменьшалось.
При исследовании гуморального звена иммунитета нами выявлено, что у детей с эрозивными процессами в слизистой оболочке желудка и двенадцатиперстной кишки достоверно повышается содержание IgM, другие классы иммуноглобулинов также имеют тенденцию к возрастанию (таблица 3). Мы наблюдали снижение процентного содержания В-лимфоцитов при обострении заболевания, что согласуется с данными литературы [9]. Общепринятое лечение и его сочетание с вентрамином способствовали росту В-лимфоцитов, причем в последнем случае наблюдался больший эффект.
Нами установлена тенденция к нормализации числа лейкоцитов и абсолютного числа лимфоцитов при традиционном лечении. При добавлении вентрамина в комплекс терапии этот процесс усиливается, и содержание исследуемых клеток достоверно не отличается от контроля. Данный эффект цитаминов желудка мы расцениваем как положительный. При применении вентрамина возрастало относительное содержание CD3+ и CD4+. CD8+ понижались, не достигая, однако, контрольных цифр. Иммуно-регуляторный индекс при традиционной терапии не изменялся, а при лечении вентрамином достоверно возрастал. Значительных изменений содержания NК-клеток не выявлено. Аналогичные результаты получены другими авторами при использовании натуральных иммуностимуляторов [4, 5]. Как общепринятое, так и лечение вентрамином еще больше стимулирует выработку IgА и IgG. При этом снижается концентрация IgM, наиболее это выражено при приеме органоспецифичного полипептида (таблица 4).
Таблица 3
Динамика показателей гуморального иммунитета (М±m)
|
Исследуемые показатели |
Контроль n=15 |
До лечения n=25 |
После лечения |
|
|
Общепринятое n=12 |
Вентрамин n=13 |
|||
|
IgА г/л |
2,25±0,29 |
2,50±0,17 p>0,05 |
3,71±0,20 p<0,001 p1<0,001 |
4,35±0,31 p<0,001 p1<0,001 p2<0,05 |
|
IgG г/л |
10,48±2,26 |
14,15±0,84 p>0,05 |
14,73±0,6 p>0,05 p1>0,05 |
19,6±1,1 p<0,001 p1<0,001 p2<0,001 |
|
IgM г/л |
1,15±0,15 |
1,69±0,06 p<0,01 |
1,47±0,07 p>0,05 p1<0,05 |
1,14±0,08 p>0,05 p1<0,001 p2<0,01 |
|
CD22+ % |
25,4±2,3 |
21,2±2,1 p>0,05 |
21,3±1,2 p>0,05 p1>0,05 |
28,2±1,9 p>0,05 p1<0,05 p2<0,01 |
|
CD22+ 1 мкл |
530±13 |
730±64 p<0,01 |
696±49 p<0,01 p1>0,05 |
742±51 p<0,001 p1>0,05 p1>0,05 |
Примечание: р – показатель достоверности разницы с контролем
р1 – показатель достоверности разницы до лечения и после лечения
р2 – показатель достоверности разницы после общепринятого лечения и после лечения вентрамином
Таблица 4
Динамика интерлейкинов при лечении вентрамином детей, больных эрозивным гастродуоденитом (M±m)
|
Показатель |
Здоровые |
До лечения n=12 |
После лечения |
|
|
Вентрамин n=6 |
Традиционное лечение n=6 |
|||
|
IL-4 |
50,8±4,7 |
11,4±1,2 р1<0,01 |
26,3±3,9 р2<0,01 |
9,0±1,3 |
|
IL-8 |
42,5±1,7 |
220,4±14,6 р1<0,01 |
106,5±15,3 р2<0,01 |
167,2±19,5 р2<0,05 |
|
IL-1α |
12,3±1,3 |
75,4±5,7 р1<0,01 |
114,2±8,2 р2<0,05 |
77,4±6,8 |
Примечание: р1 – достоверность различий по сравнению с контролем,
р2 – достоверность различий до и после лечения
До лечения IL-1α был увеличен в 6,1 раза. Уровень IL-8 составил 220,4 ±35,7 пг/мл (увеличение в 4,4 раза по сравнению с нормой). IL-4 был снижен до 11,4±1,2 пг/мл. Таким образом, отмечается увеличение провоспалительных интерлейкинов и снижение противовоспалительного IL-4. Наши данные совпадают с мнение других авторов о значительной роли цитокинов в патогенезе гастрита у детей [11]. После традиционной терапии уровень IL-1α практически не изменяется, а IL-8 снижается незначительно. Интерлейкин-4 после традиционного лечения продолжает снижаться. После терапии вентрамином IL-8 значительно (р <0,01) снижается, не достигая, однако, нормы. Уровень IL-4 несколько увеличивается. Отмеченные факты показывают, что в процессе лечения детей происходят неоднородные изменения. При этом на традиционном лечении содержание противоспалительного цитокина IL-4 даже уменьшается, а провоспалительный IL-8 сохраняется значительно увеличенным, что является плохим прогностическим признаком. Включение в комплексную терапию вентрамина не приводит к полной нормализации интерлейкинов, однако снижение IL-8 говорит о благоприятной динамике процесса.
При анализе показателей ПОЛ (таблица 5) установлено исходное снижение уровня веществ в изолированными двойными связями (Р<0,01) в гептановой фазе липидного спектра. В гептан экстрагируются неполярные компоненты (насыщенные жирные кислоты, воска). Можно предполагать, что вещества с изолированными двойными связями у детей с ЭГ подвергаются более сильному окислению, т.к. они являются субстратами реакций ПОЛ. Количество первичных (диеновые конъюгаты) и вторичных (кетодиены и сопряженные триены) продуктов ПОЛ увеличено по сравнению с контролем. После лечения вентрамином эти показатели нормализуются. Соотношение между первичными, вторичными продуктами ПОЛ и субстратами для этих реакций наглядно показывают коэффициенты Е232/220 и Е278/220. Они значительно (Р<0,01) увеличены в начале заболевания и имеют выраженную тенденцию к снижению после применения вентрамина. В тоже время, при традиционной терапии Е278/220 не изменяется, а Е232/220 даже возрастает.
В изопропанол экстрагируются полярные липиды (главным образом, фосфолипиды). Количество первичных и вторичных продуктов в изопропанольной фазе также значительно выше, чем в контроле. После лечения органоспецифическим цитамином желудка эти показатели нормализуются, тогда как при традиционной терапии сохраняются повышенными. При анализе коэффициентов липопероксидации установлено преобладание Е278/220 и нормализация его после применения вентрамина.
К промежуточным продуктам ПОЛ относятся вещества, реагирующие с тиобарбитуровой кислотой, главным образом – малоновый диальдегид. Установлено, что количество ТБК-активных продуктов при ЭГ увеличено на 90% по сравнению с нормой (Р<0,01). После лечения вентрамином их количество значительно снижается (Р<0,001), тогда как при традиционной терапии лишь имеет тенденцию к нормализации. Конечные продукты ПОЛ (основания Шиффа) у больных хроническим гастродуоденитом до лечения увеличены более, чем в 2 раза. После терапии отмечается достоверное снижение оснований Шиффа в обеих группах, однако, более выраженное при включении в комплексное лечение вентрамина. Увеличение продуктов ПОЛ приводит к характерному для данной группы больных синдрому эндогенной интоксикации [13] и вторичной лактазной недостаточности [14].
Таблица 5
Влияние вентрамина на показатели перекисного окисления липидов и антиоксидантную защиту у детей с эрозивным гастродуоденитом (M±m)
|
Показатель |
Здоровые (n=20) |
До лечения (n=43) |
После лечения |
|
|
Вентрамин (n=20) |
Традиционное лечение (n=23) |
|||
|
Сыворотка:Гептановая фаза: |
||||
|
Вещества с изолированными двойными связями (ΔЕ220/мг липидов) |
0,119±0,007 |
0,104±0,008 р1<0,01 |
0,09 ±0,008 р2>0,05 |
0,114±0,011 р2>0,05 |
|
ДК(ΔЕ232/ мг липидов) |
0,258±0,021 |
0,305±0,022 р1<0,05 |
0,225±0,027 р2<0,05 |
0,298±0,019 р2>0,05 |
|
КД и СТ (?Е278 ⁄мг липидов) |
0,151±0,012 |
0,240±0,027 р1<0,05 |
0,151±0,017 р2<0,01 |
0,219±0,018 р2<0,01 |
|
Е232/220 |
2,15±0,20 |
3,30±0,10 р1<0,01 |
2,54±0,31 р2<0,05 |
2,77±0,16 р2<0,05 |
|
Е278/220 |
1,27±0,07 |
2,12±0,13 р1<0,01 |
1,75±0,02 р2>0,05 |
1,99±0,17 р2>0,05 |
|
Изопропанольная фаза: |
||||
|
Вещества с изолированными двойными связями (ΔЕ220/мг липидов) |
0,435±0,036 |
0,545±0,050 р1>0,05 |
0,435±0,021 р2>0,05 |
0,576±0,035 р2>0,05 |
|
ДК(ΔЕ232/мг липидов) |
0,490±0,017 |
0,668±0,075 р1<0,05 |
0,515±0,025 р2<0,05 |
0,725±0,047 р2>0,05 |
|
КД и СТ (ΔЕ278/мг липидов) |
0,399±0.042 |
0,526±0,037 р1<0,01 |
0,426±0,021 р2<0,01 |
0,663±0.035 р2>0,05 |
|
Е232/Е220 |
1,28±0,02 |
1,45±0,11 р1>0,05 |
1,33±0,09 р2>0,05 |
1,38±0,05 р2>0,05 |
|
Е278/220 |
0,92±0,03 |
1,03±0,023 р1<0,05 |
0,96±0,07 р2<0,05 |
1,17±0,04 р2>0,05 |
|
ТБК-активные продукты (мкмоль/мг липидов) |
2,40±0,20 |
4,57±0,24 р1<0,001 |
2,81±0,22 р2<0,001 |
3,98±0,24 р2>0,05 |
|
Основания Шиффа |
0,71±0,04 |
1,48±0,13 р1<0,04 |
0,78±0,06 р2<0,04 |
1.04±0,11 р2<0,05 |
|
АОА (%) |
11,37±0,18 |
13,97±0,40 р1<0,05 |
11,50±0,31 р2<0,05 |
11,43±0,50 р2>0,05 |
|
Каталаза (мкмоль.с/мг белка) |
2,04±0,03 |
1,68±0,05 р1<0,01 |
2,01±0,03 р2<0,01 |
1,91±0,03 р2<0,05 |
|
Эритроциты: |
||||
|
ТБК-активные продукты (мкмоль/л) |
60,54±2,24 |
66,38±1,71 р1<0,05 |
60,54±1,24 р2<0,01 |
59,37±2,03 р2>0,05 |
|
Каталаза (мкмоль.с/мг белка) |
13,75±0,55 |
13,13±0,85 р1>0,05 |
13,24±0,52 р2>0,05 |
11,62±0,47 р2>0,05 |
|
ПРЭ (% гемолизированных клеток) |
3,05±0,27 |
5,41±0,53 р1<0,01 |
2,82±0,34 р2<0,001 |
6,08±0,47 р2>0,05 |
Примечание: р1 – разница больных по сравнению со здоровыми
р2 – разница больных до и после лечения
Антиоксидантная активность (АОА) у больных ЭГ увеличена (Р<0,05). По-видимому, это компенсаторный процесс в ответ на усиление реакций ПОЛ. После применения вентрамина этот показатель нормализуется. Активность каталазы сыворотки исходно снижена (Р<0,05), после лечения вентрамином скорость каталазной реакции увеличивается.
В эритроцитах больных увеличено содержание ТБК-активных продуктов по сравнению со здоровыми детьми, и отмечается нормализация их после лечения вентрамином. Изменений активности каталазы эритроцитов мы не выявили ни по сравнению с контролем, ни после применения цитамина желудка. Количество гемолизированных клеток (ПРЭ) при ЭГ значительно (на 77%) выше, чем в норме. Лечение вентрамином нормализует этот показатель, тогда как традиционная терапия не влияет на изучаемые параметры.
Выводы
1. Использование вентрамина при лечении эрозивных гастродуоденитов у детей приводит к скорейшему купированию клинических проявлений заболевания, нормализации дифференцировки и развития Т- и В-лимфоцитов, стимуляции выработки защитных белков – иммуноглобулинов А и G, при нормализации уровня IgM.
2. У детей с эрозивным гастродуоденитом выявлено увеличение провоспалительных и снижение противовоспалительных цитокинов. Применение вентрамина приводит к снижению интерлейкина-8.
3. Больные хронически гастродуоденитом, характеризуются увеличением первичных, вторичных, промежуточных и конечных продуктов перекисного окисления липидов; антиоксидатная активность при этом увеличена. Применение вентрамина способствует нормализации процессов перекисного окисления липидов.
4. Рекомендуется использование вентрамина в комплексном лечении больных эрозивным гастродуоденитом.